El gen TWIST 2 es un factor de transcripción que pertenece a la familia de bHLH. Dos mutaciones (Q119X y Q65X) en TWIST 2 codifican para la forma truncada de los factores de trascripción que son postulados a causar el síndrome setleis. Este síndrome esta caracterizada por desarrollo craneal y facial anormal. Por ahora la forma normal de TWIST 2 fue clonada en un vector de expresión pCl-neo y marcada en el terminal amino con un epítope Myc produciendo una proteína recombinante. Este constructo fue luego transfectado en células Hela usando un método basado en lípidos. Los niveles de expresión de la proteína fueron analizados utilizando western blots. Todo esto se realizó para optimizar las condiciones con las que se tranfectaran las células Hela. Actualmente estamos en el proceso de preparar los constructos de las regiones regulatorias de CHRDL1 y clonandolos en el vector reportero pGL4 . Si se logra completar lo antes mencionado la semana entrante espero obtener los resultados del ensayo de gen reportero pGL4. Los resultados de estos ensayos me dejaran saber con qué regiones de CHRDL1 es que interactúa TWIST 2. El trabajar en este nuevo proyecto ha sido una experiencia muy enriquecedora y he tenido la oportunidad de en el poco tiempo aprender nuevas técnicas y familiarizarme muy bien con el proyecto. Espero para el semestre próximo continuar con el mismo proyecto y terminar los objetivos que no se pudieron completar en este semestre. Además espero aprender nuevas técnicas y trazar nuevos objetivos para poder determinar si Twist 2 regula a CHRDL1 de manera directa y que mecanismo utiliza.
